banderolë

Prezantimi i teknologjisë së nxjerrjes së acidit nukleik

Nacidi ukleikihyrje

Acidi nukleik ndahet në acid deoksiribonukleik (ADN) dhe acid ribonukleik (ARN), ndër të cilët ARN ndahet në ARN ribozomale (rARN), ARN lajmëtare (mARN) dhe ARN transferuese (tARN) sipas funksioneve të ndryshme.ADN-ja është e përqendruar kryesisht në bërthamë, mitokondri dhe kloroform, ndërsa ARN-ja shpërndahet kryesisht në citoplazmë.Si bazë materiale e shprehjes së gjeneve, nxjerrja e acidit nukleik luan një rol jashtëzakonisht të rëndësishëm në kërkimin e biologjisë molekulare dhe diagnozën klinike molekulare.Përqendrimi dhe pastërtia e ekstraktimit të acidit nukleik do të ndikojë drejtpërdrejt në PCR, sekuencën, ndërtimin e vektorit, tretjen e enzimës dhe eksperimente të tjera.

 Metoda e nxjerrjes dhe pastrimit të acidit nukleik 

① Metoda e nxjerrjes së fenolit/kloroformit

Ekstraktimi i fenolit/kloroformit është një metodë klasike për nxjerrjen e ADN-së, e cila kryesisht përdor dy tretës të ndryshëm organikë për të trajtuar mostrat, duke tretur acidin nukleik të bazuar në ADN në fazën e ujit, lipidet në fazën organike dhe proteinat midis dy fazave.Kjo metodë ka avantazhet e kostos së ulët, pastërtisë së lartë dhe efektit të mirë.Disavantazhet janë funksionimi i ndërlikuar dhe koha e gjatë.

② Metoda Trizol

Metoda Trizol është një metodë klasike për nxjerrjen e ARN-së.Metoda Trizol ndahet në fazë ujore dhe në fazë organike pas centrifugimit me kloroform, në të cilën ARN shpërndahet në fazën ujore, faza ujore transferohet në një tub të ri EP, precipitimi fitohet pas shtimit të izopropanolit dhe më pas pastrimi me etanol.Kjo metodë është e përshtatshme për nxjerrjen e ARN-së nga indet e kafshëve, qelizat dhe bakteret.

③ Metoda e pastrimit të kolonës centrifugale

Metoda e pastrimit të kolonës së centrifugës mund të përthithë ADN-në në mënyrë specifike përmes materialeve speciale të adsorbimit të matricës së silikonit, ndërsa ARN dhe proteina mund të kalojnë pa probleme, dhe më pas të përdorin kripë të lartë PH të ulët për të kombinuar acidin nukleik, kripë të ulët elucionin me vlerë të lartë PH për të ndarë dhe pastruar acidin nukleik.Përparësitë janë përqendrimi i lartë i pastrimit, stabiliteti i lartë, pa nevojë për tretës organik dhe kosto e ulët.Disavantazhi është se duhet të centrifugohet hap pas hapi, më shumë hapa funksionimi.

fiytjt (1)

④ Metoda e rruaza magnetike

Metoda e rruazave magnetike është të ndahet kampioni i indit qelizor përmes lizatit, lirimi i acidit nukleik në mostër dhe më pas molekulat e acidit nukleik absorbohen në mënyrë specifike në sipërfaqen e rruazës magnetike, ndërsa papastërtitë si proteinat dhe sheqernat mbeten në lëngun.Nëpërmjet hapave të ndarjes së indeve qelizore, lidhjes së rruazës magnetike me acidin nukleik, larjes së acidit nukleik, elucionit të acidit nukleik etj., përfundimisht fitohet acidi nukleik i pastër.Përparësitë janë funksionimi i thjeshtë dhe përdorimi në kohë të shkurtër, pa nevojën e centrifugimit me hapa.Ka kërkesa të ulëta teknike dhe mund të realizojë funksionim automatik dhe masiv.Kombinimi specifik i rruazës magnetike dhe acidit nukleik e bën acidin nukleik të nxjerrë me përqendrim dhe pastërti të lartë.Disavantazhi është se çmimi aktual i tregut është relativisht i shtrenjtë.

fiytjt (2)

⑤ Metoda të tjera

Përveç katër metodave të mësipërme, dallohen plasaritja me valë, metoda e kripës së koncentruar, metoda e detergjentit anionik, metoda tejzanor dhe metoda enzimatike, etj.

 Lloji i nxjerrjes së acidit nukleik

Foregene ka platformën kryesore në botë Direct PCR, platformën e izolimit të ARN-së me dy kolona (vetëm ADN + vetëm ARN).Produktet kryesore përfshijnë komplete izolimi të ADN/ARN-së, seri reagentësh molekularë laboratorikë të reagentëve PCR dhe PCR të drejtpërdrejtë.

① Nxjerrja totale e ARN-së

Mostrat totale të ekstraktimit të ARN-së përfshijnë gjakun, qelizat, indet e kafshëve, bimët, viruset, etj. Pastërtia e lartë dhe përqendrimi i lartë i ARN-së totale mund të merret nëpërmjet nxjerrjes totale të ARN-së, e cila mund të përdoret në RT-PCR, analizën e çipit, përkthimin in vitro, klonimi molekular, Dot Blot dhe eksperimente të tjera.

Lidhur me ForegeneKompletet e izolimit të ARN-së

fiytjt (3)

Kompleti i izolimit total të ARN-së së Kafshëve--Ekstraktoni shpejt dhe me efikasitet ARN totale me pastërti të lartë dhe me cilësi të lartë nga inde të ndryshme të kafshëve.

fiytjt (4)

Kompleti i izolimit të ARN-së totale të qelizave--ARN totale shumë e pastruar dhe me cilësi të lartë mund të merret nga qeliza të ndryshme të kultivuara në 11 minuta.

fiytjt (5)

Kompleti i izolimit të ARN-së totale të bimëve--Ekstraktoni shpejt ARN totale me cilësi të lartë nga mostrat e bimëve me përmbajtje të ulët polisakaride dhe polifenol.

fiytjt (6)

Kompleti i izolimit të ARN-së virale-- Izoloni dhe pastroni me shpejtësi ARN virale nga mostra të tilla si plazma, serumi, lëngjet trupore pa qeliza dhe supernatantët e kulturës qelizore.

② Nxjerrja gjenomike e ADN-së

Mostrat e nxjerrjes së ADN-së gjenomike përfshijnë tokën, feçet, gjakun, qelizat, indet e kafshëve, bimët, viruset, etj. Ekstraktimi i ADN-së gjenomike mund të përdoret në tretjen e enzimave, ndërtimin e bibliotekës së ADN-së, PCR, përgatitjen e antitrupave, analizën e hibridizimit të Western Blot, çipin e gjeneve, të lartë -sekuenca e përpunimit dhe eksperimente të tjera.

Lidhur me ForegeneKomplete për izolimin e ADN-së

fiytjt (7)

Kompleti i izolimit të ADN-së së indeve të kafshëve--Nxjerrja dhe pastrimi i shpejtë i ADN-së gjenomike nga burime të shumta, si indet e kafshëve, qelizat, etj.

fiytjt (8)

Kit Midi i ADN-së së gjakut (1-5 ml)--Pastrimi i shpejtë i ADN-së gjenomike me cilësi të lartë nga gjaku i antikoaguluar (1-5ml).

fiytjt (9)

Kompleti i izolimit të ADN-së me shtupë bukale/kartë FTA-- Pastroni shpejt ADN-në gjenomike me cilësi të lartë nga mostrat e shtupës bukale/kartës FTA.

fiytjt (10)

Kompleti i izolimit të ADN-së së bimëve-- Pastroni shpejt dhe merrni ADN gjenomike me cilësi të lartë nga mostrat e bimëve (përfshirë polisaharidet dhe mostrat e bimëve polifenol)

③ Nxjerrja e plazmidës

Plazmidi është një lloj ADN-je rrethore e molekulës së vogël në qeliza, e cila është një bartës i zakonshëm për rikombinimin e ADN-së.Metoda e ekstraktimit të plazmidit është heqja e ARN-së, ndarja e plazmidit nga ADN gjenomike bakteriale dhe heqja e proteinave dhe papastërtive të tjera për të marrë plazmid relativisht të pastër.

fiytjt (11)

Paketa e përgjithshme Plasmid Mini-- Pastroni shpejt ADN-në plazmide me cilësi të lartë nga bakteret e transformuara për eksperimente rutinë të biologjisë molekulare si transformimi dhe tretja e enzimave

④ Llojet e tjera të nxjerrjes, nxjerrja e miRNA, etj.

fiytjt (12)

Kompleti i izolimit të miRNA të kafshëve-- Ekstraktoni shpejt dhe me efikasitet fragmente të vogla të ARN-së të miRNA, siRNA, snARN 20-200 nt nga inde dhe qeliza të ndryshme të kafshëve

 Rezultati i kërkesave për nxjerrjen dhe pastrimin e acidit nukleiks

① Për të siguruar integritetin e strukturës primare të acidit nukleik.

② Zvogëloni ndërhyrjen e proteinave, sheqernave, lipideve dhe makromolekulave të tjera

③ Nuk duhet të ketë tretës organik ose përqendrim të lartë të joneve metalike që mund të pengojnë enzimën në mostrat e acidit nukleik.

④ ARN dhe kontaminimet e tjera të acideve nukleike duhet të eliminohen gjatë nxjerrjes së ADN-së dhe anasjelltas.

 


Koha e postimit: Nëntor-24-2022
nav_ikona